Efeito da radiação vermelha de baixa intensidade sobre o sêmen canino criopreservado / Effect of low intensity red light on the canine semen cryopreservation

O objetivo geral deste trabalho foi analisar o efeito da radiação vermelha de baixa intensidade sobre alguns parâmetros cinéticos do espermatozoide canino criopreservado. Ejaculados de oito cães adultos foram centrifugados, rediluídos em meio tris-gema de ovo com 6% de glicerol, e, posteriormente, fracionados em: T1: incidência de radiação vermelha (660 NM) (Fisioled - Mmoptics - 100mW) por 60 segundos, antes do resfriamento e após a descongelação; T2: incidência somente antes do resfriamento; T3: incidência somente após a descongelação; e T4: sem incidência. Após a descongelação, as amostras foram submetidas ao TTR utilizando-se Sperm Class Analyzer(r). No TTR0, TTR60 e TTR90, não houve diferença entre as variáveis analisadas pelo CASA. Somente no TTR30 os efeitos da incidência da radiação vermelha foram evidentes e significativos em T1 e T2; T1 resultou em baixa MT (12,5 + 10,6%) e T2 determinou o melhor resultado de MT 40,3 + 26,1%. De forma similar T1 apresentou maior número de espermatozoides estáticos (77,5±28,9%) em relação ao T2 (50,6±28%). Concluiu-se que a dupla incidência de radiação vermelha de baixa intensidade antes do resfriamento e após a descongelação teve efeito deletério sobre a motilidade do espermatozoide canino, expressa principalmente aos 30 minutos após descongelação.

The aim of this study was to analyze the effect of low intensity red light on some kinetic parameters of cryopreserved canine sperm. Ejaculates from 08 adult dogs were centrifuged, diluted in Tris-egg yolk with 6% glycerol, and subsequently separated into: T1: incidence of red light (660 nm) (Fisioled -MMOptics - 100mW) for 60 seconds before the cooling and after thawing, T2: just before cooling, T3: only after thawing, and T4: no incidence. After thawing the samples were subjected to TTR using Sperm analyzer(r). In TTR0, TTR60 and TTR90 there were no differences between the variables analyzed by CASA. Only in TTR30 the effects of the incidence of red light were visible and significant in T1 and T2. T1 resulted in low MT (12.5 ±10.6%) and T2 determined the best result of MT 26.1%±40.3. Similarly T1 showed a higher number of static spermatozoa (77.5±28.9%) compared to T2 (50.6±28%). We concluded that the double incidence of low intensity red light, before cooling and after thawing, had a deleterious effect on canine sperm motility expressed at 30 minutes after thawing.

Protocolos de produção in vitro de embriões na raça Gir / In vitro embryo production protocols in Gir breed

Avaliaram-se os efeitos de dois protocolos de punção folicular na quantidade/qualidade dos oócitos e na produção in vitro de embriões, em vacas da raça Gir, não-lactantes. O ciclo estral foi sincronizado com cloprostenol e ao longo do experimento os animais receberam implantes auriculares de norgestomet, renovados a cada 14 dias. Os animais foram submetidos aos protocolos I (sem estimulação hormonal, com punção folicular duas vezes/semana) e II (pré-tratamento com 250 UI de FSH em doses decrescentes, três dias antes da punção folicular). Os oócitos recuperados foram levados ao laboratório em meio TALP-Hepes e submetidos à maturação. Na fecundação in vitro utilizou-se sêmen de touro Gir, previamente capacitado. Após 22 horas de fecundação, os prováveis zigotos foram co-cultivados com células da granulosa em CR2aa acrescido de 10 por cento de soro fetal bovino. A taxa de clivagem foi avaliada 72 horas pós-fecundação e a de blastocisto 192 horas pós-fecundação. O número total de folículos foi maior (P<0,05) no protocolo II, assim como o número de folículos grandes e médios (P<0,05) e o diâmetro do maior folículo (P<0,05), sendo o número de folículos pequenos (P<0,05) menor. O total de oócitos recuperados por sessão não foi diferente entre os protocolos I e II (P>0,05). O número de oócitos de grau I e a taxa de clivagem foram maiores (P<0,05) e o número de degenerados menor protocolo II. A pré-estimulação ovariana com FSH pode melhorar a qualidade e a taxa de clivagem dos oócitos recuperados por punção folicular em animais Gir.

The effect of two ovum pick-up protocols on amount/quality of oocytes retrived and on in vitro embryo production of Gyr cows was evaluated in non-lactating cycling cows with good body and reproductive conditions. Estrous cycles were synchronized with cloprostenol. During the experiment, animals received norgestomet ear implants, replaced every 14 days. Animals were submitted to protocol I (without hormonal estimulation) and protocol II (pre-stimulation with 250 IU of FSH three days before aspiration). Recovered oocytes were transported in Talp-Hepes to the laboratory, classified and maturated. Twenty two hours after fertilization, presumptive zygotes were co-culture with granulosa cells in CR2aa supplemented with 10 percent of fetal calf serum. Cleavage rate was assessed at 72 hours post-fertilization, and blastocyst production 192 hours post-fertilization. The total number of follicles, the number of large and medium follicles and the diameter of the largest follicle were higher (P<0.05) in protocol II, and the number of small follicles (P<0.05) was lower than in protocol I. No difference between protocols I and II was observed for oocytes recovered per aspiration section (P>0.05). The number of grade I oocytes and cleavage rate were higher (P<0.05) in protocol II and the number of degenerated oocytes was lower (P<0.05). The pre-stimulation with FSH can improve the quality and cleavage rate of oocytes recovered by ovum pick-up in zebu animals.

Efeitos da rufiaçäo e da manipulaçäo do sistema genital sobre a fertilidade de éguas inseminadas / Effects of teasing and genital manipulation upon the fertility of inseminated mares

Estudaram-se os efeitos da rufiaçäo e da manipulaçäo do sistema genital (estocadas) sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen fresco (exp. 1) e resfriado/transportado a 14ºC/3,6 horas (exp. 2). No experimento 1 utilizaram-se 42 ciclos de 29 éguas, e no experimento 2, 148 ciclos de 100 éguas, distribuídos aleatoriamente em quatro grupos experimentais definidos por um esquema fatorial 2 x 2, com número desigual de repetiçöes, de acordo com o tipo de rufiaçäo utilizado (éguas rufiadas e näo rufiadas) e o tipo de manipulaçäo do sistema genital da fêmea no momento da inseminaçäo (estocadas e näo estocadas). Em ambos os experimentos näo se observou efeito da estimulaçäo sexual da égua sobre a fertilidade. No experimento 2 näo se observou efeito da estimulaçäo sexual sobre a dinâmica de crescimento folicular e ovulaçäo